Продавець Интернет-магазин аюрведы Тabarishop розвиває свій бізнес на Prom.ua 12 років.
Знак PRO означає, що продавець користується одним з платних пакетів послуг Prom.ua з розширеними функціональними можливостями.
Порівняти можливості діючих пакетів
Кошик
905 відгуків
Інтернет-магазин Аюрведи Tabarishop
Контакти
+380 (93) 247-67-34
+380 (67) 219-81-90
Інтернет - магазин аюрведи Таbarishop
менеджер компании
Київ, Україна
tabarishop.сom.uaeldovgalyuk@gmail.com
Наявність документів
Знак Наявність документів означає, що компанія завантажила свідоцтво про державну реєстрацію для підтвердження свого юридичного статусу компанії або фізичної особи-підприємця.
+380 (93) 247-67-34
+380 (67) 219-81-90

Апоптоз сперматозоїдів: клінічне значення

Апоптоз сперматозоїдів: клінічне значення

Апоптоз сперматозоїдів: клінічне значення
Стрелко Р. В.,
Бутенко Ю. Р.,
Марцинко О. Б.
Клініка генетики репродукції «ВІКТОРІЯ»
р. Київ, 2009 р.
Апоптоз, або запрограмована загибель клітини, являє собою процес, за допомогою якого внутрішні чи зовнішні чинники, активуючи генетичну програму, призводять до загибелі клітини.
Апоптоз — це біохімічно специфічний тип загибелі клітини, який характеризується активацією нелизосомных ендогенних эндонуклеаз, які розщеплюють ядерну ДНК на маленькі фрагменти.
Біологічне значення апоптозу
• Видалення дефектних клітин організму.
• Підтримання гомеостазу.
• Контроль розміру органів.
• Розвиток ембріона.
З усіх формуються сперматозоїдів більше 75% зупиняються в розвитку завдяки апоптозу. Сперматозоїди, в яких був запущений цей механізм, але не був до кінця завершений (неповний апоптоз, або абортивний апоптоз), можуть мати порушення цілісності ДНК (Singh N. P., 1999; Sakkas D. 2003)
Вплив на фертильність
• У безплідних чоловіків відсоток сперматозоїдів з порушенням цілісності ДНК 25 — 30% і більше (Spano M., 2000)
• У фертильних чоловіків — до 10 — 13% (Ahmadi A., 1999)
• Була знайдена кореляція між спонтанним перериванням вагітності та збільшенням відсотка сперматозоїдів з порушенням цілісності ДНК (Carrel D. T., 2003)
Поріг — ступінь фрагментації більше 30%
При ступені фрагментації більше 30% знижується ймовірність настання вагітності до 1%. (Evenson et al.,1999; Larson et al., 2000).
Виявлення
1. Чоловічий ф-р 30%
2. Порушення овуляції 25%
3. Трубний чинник 20%
4. Безпліддя неясного генезу 25%
5. Ендометріоз 5%
6. Эякуляторная дисфункція 5%
7. Шийковий фактор 3%
8. Анатомічні аномалії матки <1
15% пар мають більше 1 причини безпліддя
Фрагментація ДНК
Клінічні прояви: безпліддя у шлюбі неясної етіології (Evenson et al.,1999; Larson et al., 2000), з/а, низька якість ембріонів, зниження частоти настання вагітності в програмах ДРТ (Genesca et al, 1992; Parinaud et al, 1993; Twigg et al, 1998; Evenson et al, 1999).
Причини апоптозу
Зовнішні
1. Агресивні хімічні середовища
2. Іонізуюче випромінювання
3. Зараження вірусами
4. Локальна гіпертермія (пр. варикоцеле)
5. Куріння
6. Екологічна обстановка
Внутрішні
1. Генетичний апарат
Технологія дослідження
• Основа технології— відмітний відповідь, ядер сперматозоїдів з фрагментованою ДНК порівняно з іншими сперматозоїдами.
• Контрольована денатурація ДНК, супроводжується видаленням ядерних білків.
• Петлі ДНК розширюються, формуючи ореол дисперсії хроматину.
• Ядро сперматозоїдів з фрагментованою ДНК не розвиває ореол дисперсії або ореол мінімальний.
Ознаки апоптозу
• Зміни клітинної мембрани.
• Розпад клітинного ядра.
• Ущільнення хроматину.
• Фрагментація ДНК.
• Фрагментація клітин.
Критерії оцінки ступеня фрагментації ДНК сперматозоїдів
F — сперматозоїд з фрагментованою ДНК
N — нормальний сперматозоїд
Критерії оцінки ступеня фрагментації ДНК сперматозоїдів
СПЕРМАТОЗОЇДИ БЕЗ ФРАГМЕНТАЦІЇ ДНК
• Сперматозоїди з великим ореолом, де товщина ореолу дорівнює, або більше діаметра ядра.
• Сперматозоїди з ореолом середнього розміру, де товщина ореолу повинна бути більше 1/3 діаметра ядра.
СПЕРМАТОЗОЇДИ З ФРАГМЕНТАЦІЄЮ ДНК
• Сперматозоїди з маленьким ореолом: товщина ореолу дорівнює або менше, ніж 1/3 діаметра ядра.
• Сперматозоїди без ореолу.
Візуалізацію ядер сперматозоїдів проводили:
• На мікроскопі Zeiss Axio Imager M-1 з використанням иммерсионного об'єктива флуоресцентного мікроскопа при збільшенні х 100
• Підрахунок — 500 сперматозоїдів в досліджуваному зразку
Мета роботи
Виявити ступінь фрагментації ДНК сперматозоїдів різних зразків еякуляту а також взаємозв'язок з эмбриологическими показниками: запліднення, дроблення, здатність до формування бластоцист, настання вагітності.
Матеріали і методи
В аналіз увійшли 32 зразка еякуляту пацієнтів після невдалих програм ДРТ (ICSI)
Невдалі спроби ICSI:
• 81,3% — підвищений (> 30%) відсоток спермального апоптозу (n = 26)
• 18,7% — нормальний відсоток спермального апоптозу (n = 6)
Окремі показники спермограми чоловіків з різним рівнем фрагментації ДНК сперматозоїдів
№ Досліджуваний показник ↑ рівень фр. ДНК N рівень фр. ДНК
1 Объєм еякулята (мл) 2,4 2,2
2 Концентрація (млн/мл) 12,5 8,1
3 Рухливість кат. А (%) 4,5 11,3
4 Рухливість кат. А + В (%) 19,2 23,3
5 Нормальна морфологія (%) 28,5 26,5
Характеристика груп
№ Досліджуваний показник ↑ рівень фр. ДНК N рівень фр. ДНК
1 Середній вік жінок пацієнтів (років) 29,2 28,9
2 Середній вік пацієнтів (років) 33,1 31,8
3 Середній рівень ФСГ дружин 5,8 5,3
4 Тривалість стимуляції (днів) 9,8 9,4
5 Доза гонадотропінів (амп. ) 35,1 35,7
Эмбриологические показники при різних рівнях фрагментації ДНК сперматозоїдів
№ Досліджуваний показник ↑ рівень фр. ДНК N рівень фр. ДНК
1 Середня кількість ооцитів на пункцію 12,3 16,2
2 Відсоток запліднення 73 71
3 Відсоток дроблення 83,5 92
4 Відсоток ембріонів категорії А і В на з-й добу культивування 34,6 58,5
5 Відсоток виходу бластоцист 25,1 45,3
Фрагментація ДНК сперматозоїдів виявлялася:
• Зниження активної рухливості сперматозоїдів
• Зниження відсотка ембріонів хорошої якості (категорія А + В)
• Зниження відсотка виходу бластоцист
Вплив антиоксидантної терапії на коефіцієнт спермального апоптозу
Медикаментозна терапія
• Вітаміни гр. С, Е, фолієва кислота, цинк
• Проксид-плюс®
Тривалість — 3 місяці
Клінічна група — пацієнти після невдалих програм екстракорпорального запліднення (ICSI), у яких було виявлено ↑ ↑ спермального апоптозу
Результати
• Зниження коефіцієнта спермального апоптозу відзначалося у всіх пацієнтів, але у 24% незначною мірою (на 2 — 7%)
• Середній відсоток сперматозоїдів з фрагментованою ДНК до лікування — 67,4%
• Середній відсоток сперматозоїдів з фрагментованою ДНК після лікування — 44,9%
Зміни в спермограмі після антиоксидантної терапії
№ Досліджуваний показник До лікування Після лікування
1 Объєм еякулята (мл) 2,5 2,2
2 Концентрація (млн/мл) 11,5 14,9
3 Рухливість кат. А (%) 10,6 14,1
4 Рухливість кат. А + В (%) 18,3 21,1
5 Нормальна морфологія (%) 24,1 35,1
Результати
• Пациент №1: 37 лет, продолжительность бесплодия 12лет, 4 попытки ИКСИ, низкий процент оплодотворения при ИКСИ. В последней — использование яйцеклеток супруги и донора. Эмбриологическая картина идентична. Уровень фрагментации ДНК сперматозоидов 87%.
• Пациент №2: 28 лет, продолжительность бесплодия 5 лет, 1 попытка ИКСИ — неудача. Апоптоз — 49%
• После проведенной терапии уровень фрагментации ДНК сперматозоидов 27%. Повторная попытка — беременность (гетерозиготная двойня).
• Пациент №4: 37 лет, продолжительность бесплодия 5 лет, бесплодие неясного генеза (нормальные показатели спермограммы, проходимые маточные трубы, овуляторные циклы). Произведено 4 программы ИСМ. Уровень фрагментации ДНК сперматозоидов 67%.
Подготовка к программе ЭКО при виявлении фрагментации ДНК
• Исключение негативных влияний внешней среды (курение, алкоголь, перегревание и т. п. ) ‏
• Антиоксидантная терапия 3 мес.
• Лечение варикоцеле
• Противовоспалительная терапия
• Применение микроэлементов (Zn) ‏
Заключение
• Визначення фрагментації ДНК сперматозоїдів є важливим доповненням до стандартного обстеження
• Показання — численні невдалі спроби ЕКЗ — ICSI, незадовільні эмбриологические показники в програмах ЕКЗ — ICSI, безпліддя неясного генезу
• Отримання стійкої ремісії причинного патології, адекватна підготовка — запорука успішної програми ЕКО — ICSI

Інші статті
  • Порошок Німа як використовувати?
    Порошок Німа як використовувати?
    Порошок із подрібненого листя нима тепер широко доступний у більшості косметичних магазинів, а також в Інтернеті. Що таке порошок Німа? В чому його користь для волосся, тіла, організму?
    Повна версія статті
  • Пральний порошок і мило Patanjali
    Пральний порошок і мило Patanjali
    Індія завжди дивує, але і там теж перуть. Перуть з милом або пральними порошками, руками і пральними машинами. Так, є звичайно колоритні пральні, такі як Дхобі Гхат, але є і звичайна повсякденна домашня прання. Патанджалі Аюрведа виробляє високоякісний пральний порошок, що складається із суміші трав. Він не тільки очищає одяг, але і зберігає шкіру в безпеці. Тепер пральні порошки Патанджалі доступні до продажу і у нас.
    Повна версія статті

Наскільки вам зручно на сайті?

Розповісти Feedback form banner